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透析袋的选择和使用方法

来源:画鸵萌宠网
创作时间:二零二一年六月三十日

透析只需要使用专用的半透膜即可完成.通常是将半透膜制成袋状, 就叫做透析袋.之巴公井开创作 创作时间:二零二一年六月三十日 自Thomas Graham 1861年发明透析方法至今已有一百多年.透析已成为生物化学实验室最简便最经常使用的分离纯化技术之一.在生物年夜分子的制备过程中, 除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术.

透析只需要使用专用的半透膜即可完成.通常是将半透膜制成袋状, 将生物年夜分子样品溶液置入袋内, 将此透析袋浸入水或缓冲液中, 样品溶液中的年夜分子量的生物年夜分子被截留在袋内, 而盐和小分子物质不竭扩散透析到袋外, 直到袋内外两边的浓度到达平衡为止.保管在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保管液”, 袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”. 透析的动力是扩散压, 扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的.透析的速度反比于膜的厚度, 正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度, 还正比于膜的面积和温度, 通常是4℃透析, 升高温度可加快透析速度.

透析膜可用植物膜和玻璃纸等, 但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜, 目前经常使用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管, 截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物年夜分子的最小分子量, 缩写为MwCO)通常为1 万左右.

创作时间:二零二一年六月三十日

创作时间:二零二一年六月三十日

商品透析袋制成管状, 其扁平宽度为23 mm~50 mm不等.为防干裂, 出厂时都用10%的甘油处置过, 并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质, 它们对卵白质和其它生物活性物质有害, 用前必需除去.可先用50%乙醇煮沸1小时, 再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤, 最后用蒸馏水冲刷即可使用.实验证明, 50%乙醇处置对除去具有紫外吸收的杂质特别有效.使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中, 若长时间不用, 可加少量NaN2, 以防长菌.洗净凉干的透析袋弯折时易裂口, 用时必需仔细检查, 不漏时方可重复使用.

新透析袋如不作如上的特殊处置, 则可用沸水煮五至十分钟, 再用蒸馏水洗净, 即可使用.使用时, 一端用橡皮筋或线绳扎紧, 也可以使用特制的透析袋夹夹紧, 由另一端灌满水, 用手指稍加压, 检查不漏, 方可装入待透析液, 通常要留三分之一至一半的空间, 以防透析过程中, 透析的小分子量较年夜时, 袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破.含盐量很高的卵白质溶液透析过夜时, 体积增加50%是正常的.为了加快透析速度, 除屡次更换透析液外, 还可使用磁子搅拌.透析的容器要年夜一些, 可以使用年夜烧杯、年夜量筒和塑料桶.小量体积溶液的透析, 可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管, 以使透析袋沉入液面以下.

创作时间:二零二一年六月三十日

创作时间:二零二一年六月三十日

检查透析效果的方法是:用1% BaCl2检查(NH4)2SO4, 用1% AgNO3 检查NaCl、KCl等.

为了提高透析效率, 还可以使用各种透析装置.使用者也可以自行设计与制作各种简易的透析装置.美国生物医学公司(Biomed Instruments Inc.)生产的各种型号的Zeineh 透析器, 由于使用对流透析的原理, 使透析速度和效率年夜年夜提高.

根据个人使用经验, 建议使用透析袋效果比力好, 还有具体需要什么规格的要看你的目的卵白量有多年夜, 才华决定使用多年夜的截留分子量的透析袋, 一般截留量越年夜价格也就会越高, 还有就是透析袋宽度的选择, 要看你的实验一次需要透析几多量来决定.目前我的实验室使用的是上海生工的透析袋, 宽度70mm 普通型的!

透析袋 的规格和使用方法

默认分类2009-12-16 12:11:02阅读931评论0字号:年夜中小

直径mm 压平宽度(半周长)mm 截留分子量

Da

22 34

3500

创作时间:二零二一年六月三十日

创作时间:二零二一年六月三十日

22 34

7000

6 10

14000

16 25

14000

22 34

14000

28 44

14000

35 55

14000

创作时间:二零二一年六月三十日

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49 77

14000

透析袋: 技术参数:

◎ PH 稳定范围:5-9

◎ 污染物水平: 硫化物<0.3%, 重金属<50ppm

◎ 化学兼容性:与很多盐兼容, 比如CaCl2,(NH4)2SO4, 还可与分子生物学及酶学中经常使用的水溶剂、有机溶剂兼容, 如异丙醇、乙醇和丙酮.

◎ 温度抵当性:可煮沸, 可高压灭菌

◎ 卵白吸附:每克透析袋吸附卵白量小于1ng 使用前处置:

1、将透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段

2、在年夜体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(PH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟

3、用蒸馏水完全清洗透析袋

创作时间:二零二一年六月三十日

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4、放在1mmol/L EDTA(PH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟 5、冷却后, 寄存于4度, 必需确保透析袋始终浸没在溶液内.从此时起取用透析袋是必需带手套的.

6、用前在透析袋内装满水然后排出, 将之清洗干净. 贮存条件:

透析袋可寄存于10-29度;每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好, 以防干裂

透析即用半透膜(透析袋)将年夜分子卵白质分离出来.在生物年夜分子制备过程中除去盐、少量有机溶剂、生物小分子杂质和浓缩

,

便

.

技术指标:MWCO(截留分子量), 单元:Diatoms . 透析时, 小于MWCO的分子在透析膜二边溶液浓度差发生的扩散压作用下渗过透析膜, 其速度与浓度梯度、膜面积及温度成正比.欲快速透析可采纳直径较小的透析袋以增加膜面积.经常使用温度:4℃, 升温、更换袋外透析液或用磁力搅拌器, 均能提高透析

使

. 知

1某些化学物质会破坏透析袋微孔且不成逆转.计有: 烃、卤化烃、醇、酮、酯、胺、丙酮、甲基乙基酮、二氧杂环

.

创作时间:二零二一年六月三十日

创作时间:二零二一年六月三十日

酸(甲酸、乙酸、稀强酸如5%HCI), 10%苯酚, 30%双氧水. 甲醇、乙醇:浓度小于5%时, 透析功能在, 而MWCO变动. 2卵白质吸附量, 小于1ug/克, (以透析袋干重计).

正常使用极限使用

PHPH

值值

5-9(可重复使用). 2-12(一次性使用).

3前处置:煮沸5分钟后用蒸馏水60℃洗冲2分钟, 置4℃蒸

.

长期保管液:0.05%-0.1%叠氮钠, 1mMEDTA或50%甘油, 温度(

4

,

使

.

4即用型透析袋毋须前处置, 使用前用蒸馏水洗净即可. 5透析袋装液时应留1/3-1/2空间, 以防透析过程中, 袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破(含盐量高的卵白质溶液透析过夜时, 体积增加

6

使

50%系正常情况). 须

.

7透析效果检查用 1%氯化钡 检查硫酸铵、硫酸钠 1%硝酸银 检查氯化钠、氯化钾

透析袋的物理抗力:透析袋由再生纤维素构成, 可以煮沸或消毒.一旦已呈湿状即不成完全干燥, 除非使用甘油重处置, 内含有液体的透析袋可冷冻, 另外, 透析袋的生物学抗力决定着透析袋的保管.

透析袋的使用后保管:透析袋对纤维素活性是敏感的, 尤其在湿状时, 可以防止溶纤维素的微生物生长, 通过将透析袋保管在4

创作时间:二零二一年六月三十日

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摄氏度含有0.05%叠氮钠溶液, 也可保管在50%甘油溶液.

创作时间:二零二一年六月三十日

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