取10～11日龄的鸡胚，照蛋检查，选取活鸡胚 在气室部用5％碘酒消毒，用酒精脱碘 用灭菌镊子击破和除去该部卵壳和卵膜 以眼科弯头镊子撕破绒尿膜和羊膜，钩住鸡胚头部，提出移于平皿内 去头、脚、翅，由腹壁开始打开胸腹壁 去掉其他内脏。用Hanks液或PBS液洗去血液，重复三次 取出心脏，放于另一平皿内 外科剪剪成1～2mm3大小的碎块 去掉其他内脏。用Hanks液或PBS液洗去血液，重复三次 将组织块放在无菌的100目筛网上，用注射器针栓研磨，不断用基本培养基冲洗，将细胞收集在无菌三角瓶中 外科剪剪成0.5mm3大小的碎块 将组织小块转移到培养瓶内，每 瓶内放置30～50块 吸取细胞悬液少许，滴到血细胞计数板上，计算四角4个大格内完整的细胞数 轻轻地倾斜摆动培养瓶，使组织小块均匀地分布于瓶内壁表面 细胞数／ml＝ (4大格活细胞总数／4)×l0 000 添加少量培养液 配成每m1含20～40万细胞的悬液，分装细胞培养瓶 2天后，在每只培养瓶内添加足量培养液 加10%的血清、1%的双抗 37℃、5% CO2，培养