鬼针草不同提取物对非酒精性脂肪肝大鼠实验研究

【摘要】目的：研究鬼针草不同提取物对非酒精性脂肪肝大鼠的影响，为该药临床开发和应用提供可靠的实验依据。方法：健康雄性sd大鼠70只，分为正常组（a）、模型对照组（b）、鬼针草乙酸乙酯萃取物组（c）、正己烷萃取物组（d）、乙醇提取物组（e）、水提取物组（f）、东宝肝泰组（g组）。除a组喂饲普通饲料外，其余各组喂饲高脂饲料。各组每日按5ml/kg剂量灌胃，a、b组给生理盐水，各给药组分别给予相应的鬼针草提取物、东宝肝泰。计算12周末各组大鼠体重增长率、腹内脂肪比重、肝指数、体重指数，制备肝匀浆检测tc、tg、mda、sod，心脏采血测血清ast、alt含量。结果：鬼针草各提取物均可显著降低体重增长率、腹内脂肪比重、肝指数、肝脏mda水平（p<0.05或p<0.01），c、e、f组可显著降低bmi、肝脏tc，升高sod活性（p<0.05或p<0.01）；e、f组有显著降低tg、ast、alt（p<0.05或p<0.01）。结论：e、f组可通过调节肝脏脂质代谢，抑制脂质过氧化，抑制非酒精性脂肪肝的形成和发展。

【关键词】鬼针草；非酒精性脂肪肝；肝功能；脂质过氧化 非酒精性脂肪肝（nafld）是指无过量饮酒史而肝实质细胞脂肪变性、脂肪贮积为特征的临床病理综合症，常与肥胖、高血脂症、高血压和糖尿病等并存。随着生活水平的提高，不良生活方式加不合理饮食结构，使nafld患病率逐渐提升，成为威胁人类健康的慢性疾病[1]。单纯性脂肪性肝病如积极治疗，可完全恢复。部分脂

肪肝如迁延不愈，可发展为肝纤维化进而形成肝硬化[2]。因此，早期积极治疗脂肪肝是预防脂肪性肝硬化的根本措施。

本课题通过研究鬼针草不同提取物对高脂饮食诱导的nafld大鼠的影响，探讨鬼针草不同提取物防治nafld的作用和机制，为开发有效治疗药物提供理论依据。 1材料与方法 1.1药物

鬼针草各提取物由南阳医专药学实验中心提供，全草入药，浓度均为1g/ml生药；东宝肝泰（吉林通化东宝药业股份有限公司，批号:070306），给药前稀释为2片/10ml。 1.2动物

健康雄性sd大鼠，spf级，体重170±30g，由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供，合格证号scxk(鄂)2004-0007。 1.3方法

健康雄性sd大鼠70只，随机分为7组，每组10只。①正常组（a组）；②模型对照组（b组）；③鬼针草乙酸乙酯萃取物组（c组）；④鬼针草正己烷萃取物组（d组）；⑤鬼针草乙醇提取物组（e组）；⑥鬼针草水提取物组（f组）；⑦东宝肝泰组（g组）。普通饲料适应性饲养1周后开始实验。除正常组喂饲普通饲料外，其余各组均喂饲高脂饲料[2]（高脂饲料配方为：基础饲料88.7%，胆固醇1%，猪油10%，胆酸钠0.3%）。各给药组每日分别按5ml/kg给予相应鬼针草提取液及东宝肝泰灌胃。a、b组给予等量生理盐水(5ml/kg)。

连续灌胃12周，禁食不禁水12h，以10%水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉，测大鼠体长（大鼠鼻尖到肛门的长度），计算bmi；心脏取血2～5ml，将血样4℃3000rpm离心10min，分离血清，密封，-20℃冷存。用全自动生化分析仪测定大鼠血清ast、alt含量；剪开腹腔取肝脏，称取肝脏重量，计算肝脏指数；取肝脏组织制成10%匀浆，高速离心后取上清液测tc、tg及mda、sod活力。分离肾脏、睾丸、腹后壁脂肪组织并称重，计算腹内脂肪比重。 1.4数据处理

原始数据采用spss10.0统计软件分析处理，结果以ｘ±s表示。 2结果

2.1体重增长率、腹内脂肪比重、bmi、肝指数（见表1） 由表1可见：①与a组比较，b组体重增长率、腹内脂肪比重、bmi、肝指数均显著增加(p<0.01)；②与b组比较，各用药组均能有效降低体重增长率、腹内脂肪比重、肝指数（p<0.05或p<0.01），c、e、f组降低bmi作用显著（p<0.05或p<0.01）。

表1各组体重增长率、腹内脂肪比重、bmi和肝指数（ｘ±s）

注：①与a组比较，d p<0.05， ddp<0.01；②与b组比较，ep<0.05， eep<0.01；③体重增长率＝（处死前体重－实验开始时体重）/实验开始时体重×100%；④腹内脂肪比重＝腹内脂肪质量/体重×100%；⑤体重指数（bmi）＝体重（kg）/体长（m）2；⑥肝指数＝肝湿重/体重×100%。

2.2肝匀浆tc,tg,sod,mda及血清ast,alt的变化 (见表2) 由表2可见：①与a组比较，b组肝匀浆tc、tg、mda，sod明显降低，血清ast、alt显著升高，p<0.01或p<0.05，证明高脂诱发的脂肪肝大鼠模型造模成功；②与b组比较，e、f组对tc、tg、ast、alt有显著性降低作用，c组tc显著降低（p<0.05或p<0.01）；c、f组sod活性显著提高（p<0.05），鬼针草各用药组均能显著降低mda水平（p<0.01）。

表2各组肝匀浆tc,tg,sod,mda及血清ast,alt的变化（ｘ±s） 3结论与和讨论

氧应激和脂质过氧化，是nafld病理生理改变进展的关键[5]。外源性高脂饮食使反应性氧产物的生成增加[6]。体内脂质在反应性氧产物的作用下，生成的过氧化脂质（lpo）、丙二醛（mda）能与膜蛋白发生交联反应，膜结构和功能被破坏，对离子的通透性增加，亦能引起细胞死亡。

生理情况下机体存在抗氧化系统，可避免组织受自由基损伤，维持机体功能的正常和结构的完整[7]。超氧化物歧化酶（sod）是有效的抗脂质过氧物酶，在防御自由基损伤方面具有重要的作用。因此mda含量和sod活性的变化间接反映了肝细胞受自由基攻击后损伤的程度，它们的变化可以作为自由基致肝细胞损伤的一种灵敏可靠的诊断性指标及预后疗效的观察[8]。

本实验表明鬼针草乙醇提取物和水提取物均可显著降低大鼠肝

匀浆tc、tg含量、mda活性，提高sod活性；降低血清ast、alt，并可较好的逆转肝脏脂肪变性，有防治nafld的作用。其机制可能是通过调节肝脏脂质代谢、抑制自由基活性、抗脂质过氧化作用，从而保护肝细胞膜结构的完整性，抑制nafld的形成和发展。 参考文献

[1] 周琦,范建高.非酒精性脂肪性肝病与冠心病的关系及相关研究进展[j].中国动脉硬化杂志,2008,16(8):669-671. [2] 李靖环,弓青梅,杨栓平,等.脂肪肝与高脂血症关系的实验研[j].长治医学院学报,2001,15(4): 241.

[3] 徐叔云,卞如濂,陈修.第3版.药理实验方法学[m].北京:人民卫生出版社,2003: 11-1296.

[4] brunt em, tiniakos dg. pathology of steatohepatitis[j]. best pract res clin gastroenterology, 2002, 16(5): 691-707. [5] 陆再英,钟南山.内科学[m].第7版.北京:人民卫生出版社,2007: 435-436.

[6]sanyal aj, campbell-sargent c, mirshahi f, et a.l nonalcoholic steatohepatitis: association of insulin resistance and mitochondrial

abnormalities[j].gasteroenterology, 2001, 120(5): 1183-92. [7]方允中,郑荣梁. 北京:自由基生物学的理论与应用[m].北京:科学出版社,2002:593.

[8]冯大明,王双,唐雅玲等.水蓑衣提取物对ccl4诱导的小鼠急

性肝损伤的保护作用[j].世界华人消化杂志,2005,13(9):1098-1110. 作者简介：

马瑜红，女，(1974- )，汉族，毕业于武汉同济医科大学，硕士学位。现为南阳医学高等专科学校副教授，从事药理学、临床药理学教学工作及中药药理与毒理的研究