山东省鸡源沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验

鉴定及药敏试验

渊1.烟台市牟平区姜格庄街道畜牧兽医工作站袁山东烟台

2.青岛润达生物科技有限公司袁山东青岛

摘

王晓艺1袁李涛2袁吕新新2袁张敏

2

264114曰

266200冤

要院为了解山东地区鸡沙门氏菌的流行及耐药情况袁本文对山东部分市县的病死鸡只

进行沙门氏菌的分离培养鉴定袁最终得到12株致病性沙门氏菌菌种袁并对分离菌株进行耐药性试验袁结果鉴定12株沙门氏菌对沙门氏菌对替米考星尧阿莫西林和林可霉素等均产生了一定的耐药性袁对润达炎迪克尧硫酸粘菌素尧呼治常安和强力霉素有一定的敏感性遥

关键词院沙门氏菌曰分离曰药敏试验

中图分类号：S858.314.4+3文献标识码：B文章编号：1673-1085（2017）04-0051-03

生袁致使该病的治疗越来越困难袁给养鸡业造成了严重的经济损失遥在这种背景下袁快速尧准确地检出病原体和体外药敏分析结果就成为必要遥本文从病死鸡中分离培养沙门氏菌袁用纸片法对分离菌株进行药物的敏感性研究袁分析鸡源沙门氏菌对各类药物的敏感性情况袁为当前流行的鸡源沙门氏菌的合理用药提供参考遥11.1

材料与方法

沙门氏菌是肠杆菌科革兰氏阴性杆菌袁广泛存在于环境或寄居于人和动物肠道内袁绝大多数对人和动物具有致病性遥鸡源沙门氏菌是鸡场的重要病原菌袁可引发鸡白痢尧鸡伤寒和禽副伤寒[1]袁其典型症状为脾脏或肝脏表面密布黄白色坏死色肉芽遥鸡源沙门氏菌在鸡群中能垂直感染袁被感染成鸡生长性能或产蛋下降袁雏鸡大批死亡袁死亡率高达80%袁已成为危害养禽业的首要传染病之品袁可使人发生食物中毒袁人畜感染后它可能加重病态或死亡率袁或者降低动物的繁殖生产力遥沙门氏菌不但会对畜牧业生产造成严重的经济损失袁而且会严重威胁人类的健康袁沙门氏菌病已成为一种常见多发的人畜共患病[3]遥

对山东部分养鸡场的鸡源沙门氏菌病的流行一[2]遥感染沙门氏菌或食用被带菌者粪便污染的食灶袁心脏出现心肌炎症状袁部分肠道或肺脏长有白

基袁肉汤培养基袁三糖铁培养基袁蛋白胨水培养基袁赖氨酸铁琼脂培养基遥

的病死鸡只袁分离自病鸡内脏袁共12株遥1.1.31.1.2

1.1.1

试验材料

培养基营养琼脂培养基袁SS琼脂培养

菌株试验菌株来自山东部分市县养鸡场

硫酸安普霉素渊Apramycin

情况进行调查袁发现沙门氏菌广泛存在于鸡场中袁由于沙门氏菌可以通过生殖道污染禽蛋袁造成种蛋的孵化率降低和污染以及鸡只的大规模发病和死亡袁引起严重的经济损失袁极大困扰着养禽业的

收稿日期：2017-03-14

考渊Florfenicol冤袁强力霉素渊Doxy冤袁替米考星渊Tilmicosin冤袁阿米卡星渊Amikacin冤袁林可霉素渊Lincomycin冤袁阿莫西林渊Amoxicillin冤袁硫酸黏菌素渊ColistinSulfate冤袁磷霉素钠渊FosfomvcinSodium冤袁州滨和生物试剂有限公司冤袁呼治常安袁润达炎迪51Sulfate冤袁硫酸新霉素渊NeomycinSulphate冤袁氟苯尼

药敏纸片

发展[4]遥此外袁滥用抗菌药物造成耐药菌株不断产

头孢噻肟钠渊Claforan冤渊注院以上药敏片均购自杭

成就未来家禽科学2017.4克渊注院以上二种药敏片为实验室自制冤遥1.21.2.1

试验方法

1.2.2

织无菌条件下接种于普通琼脂和SS琼脂培养基袁37益培养18~24h遥

鸡源沙门氏菌的分离试验将病料肝脏组

沙门氏菌的菌株进行编号袁按常规方法进行三糖铁试验尧尿素酶试验尧靛基质(吲哚)试验和赖氨酸脱羧酶试验遥结果见表1遥

鸡源沙门氏菌的鉴定试验将分离到疑似

表1培养基三糖铁尿素酶吲哚赖氨酸脱羧酶分析WF1+--WF2+--ZS1+--ZS2+--12株鸡源沙门氏菌生化鉴定结果结果ZS3+--HB1+--YT+--LX+--PD1+--HS1+--PD2+--HS2+--++++++++++++沙门氏菌沙门氏菌沙门氏菌沙门氏菌沙门氏菌沙门氏菌沙门氏菌沙门氏菌沙门氏菌沙门氏菌沙门氏菌沙门氏菌注院+院阳性袁-院阴性遥

1.2.2.11.2.2.2

养18耀24h后袁观察结果遥

将被检菌穿刺接种三糖铁琼脂袁36依1益培

对照均变黄为阴性袁赖氨酸脱羧酶肉汤变紫袁氨基酸脱羧酶对照变黄为阳性遥1.2.3

培养18~24h袁观察结果遥变红色为阳性袁不变色或者变黄色为阴性遥1.2.2.3

将被检菌接种到蛋白胨水培养基中袁36依将被检菌接种到赖氨酸脱羧酶肉汤和氨

将被检菌接种到尿素酶肉汤中袁于36依1益

组织(WHO)推荐的Kirby-Bauer纸片法进行耐药沙门氏菌对抗菌药物的敏感性测定遥用灭菌棒将于该平板上袁然后37益培养24h袁观察结果遥判定标准院抑菌圈直径>15mm为高度敏感曰10mm<抑菌圈直径<15mm为中度敏感曰抑菌圈直径<10mm为低度敏感曰无抑菌圈为不敏感遥结果见表2遥LB培养物涂抹于LB琼脂平板袁将药敏纸片贴压

鸡源沙门氏菌的药敏试验采用世界卫生

培养物液面袁观察结果遥1.2.2.4

1益培养18耀24h后袁沿试管壁滴加数滴吲哚试剂于

基酸脱羧酶对照生化管中袁于36依1益培养18耀24h

后袁观察结果遥赖氨酸脱羧酶肉汤和氨基酸脱羧酶

表2菌株号/药物润达炎迪克硫酸黏菌素硫酸安普霉素阿米卡星替米考星阿莫西林呼治常安磷霉素钠头孢噻肟钠氟苯尼考硫酸新霉素强力霉素林可霉素菌株同时敏感数d<10mm为耐药遥

WF1++++----+-+-++-3-WF2+++++++-----6++++++-ZS1+++++++-++++++---7+++ZS2+++++++-++++++---7++-鸡源沙门氏菌药敏试验结果ZS3++++++---++7+++++++++HB1++++++--++++6++++++-YT+++++++--+++6++++++-LX++++---++++++-6++--PD1++++-+-++++-++-4--HS1++++++++++++++++7++-PD2+++++---++5++++++++HS2+++-++++++++++-7++++83.33%83.33%16.67%58.33%0091.67%33.33%75.00%16.67%16.67%91.67%0敏感率注:淤野++冶院表示抑菌环直径d>15mm为高度敏感曰于野+冶院表示10mm52科学养禽PoultryScience22.1

结果

脂培养基袁37益培养18~24h袁在普通琼脂平板袁形成均一尧无色尧半透明尧表面光滑尧隆起尧边缘整齐的针尖大小的菌落袁在SS琼脂培养基上呈灰色尧圆形尧中心带黑色的可疑菌落袁染色镜检挑取单个菌落进行革兰氏染色袁在光学显微镜下观察细菌的形态及染色特点袁呈现革兰氏阴性尧无芽孢的中等大小杆菌遥

以上结果符合沙门氏菌的生长特性遥2.1.2

反应为院斜面产碱袁底层产酸袁产H2S曰于尿素酶试验院沙门氏菌反应为阴性曰盂靛基质(吲哚)试验院沙门氏菌反应为阴性曰榆赖氨酸脱羧酶试验院沙门氏菌反应为阳性遥

结合以上结果袁确定12株菌种均为沙门氏菌遥2.2

2.1.1

鸡源沙门氏菌的分离鉴定结果培养特性

敏试验来选择使用遥3.2

将病料接种普通琼脂和SS琼

菌形成抗药性袁合理科学地使用抗生素袁减少不必进行药物治疗之前袁需对分离的细菌做药敏试验袁从中选出最有效的药物进行治疗与预防遥3.3

在使用药物治疗的同时袁对鸡舍应进行严格

临床上用药时要注意交替用药袁以免沙门氏

要的抗生素滥用遥为了避免因抗药性影响治疗袁在

消毒袁保证鸡舍卫生袁加强饲养管理袁温度尧湿度尧通风尧光照应严格控制遥在禽蛋尧雏鸡的选择上应择优选择遥

参考文献院

[1][2][3]

及耐药性检测[J].农业与技术,2014(08):176-178.中国畜牧兽医,2007(09):87-88.

张步娴,李凤梅,胡杰,等.鸡源沙门氏菌的分离鉴定周廷宣.后备种鸡血清中沙门氏菌病抗体的检测[J].王贵升,田夫林,陈静,等.山东省小规模养鸡场沙门

生化鉴定结果淤三糖铁试验院沙门氏菌

氏菌流行病学调查分析[J].家禽科学,2007(05):11-13.

赵贵,张华.畜产品中沙门氏菌的危害及检测方法

生组织(WHO)推荐的Kirby-Bauer纸片法进行敏感性测定遥测试沙门氏菌对硫酸安普霉素尧硫酸新霉素尧氟苯尼考尧强力霉素尧替米考星尧阿米卡星尧林可霉素尧阿莫西林尧硫酸黏菌素尧磷霉素钠尧头孢噻肟钠尧呼治常安尧润达炎迪克的敏感性遥

根据试验结果分析可知院分离得到的12株沙门氏菌对替米考星尧阿莫西林和林可霉素的敏感率为0袁说明沙门氏菌对这三种药的耐药性高袁呈现多重耐药曰沙门氏菌分离株对润达炎迪克尧硫酸黏菌素尧呼治常安和强力霉素的敏感率高达80%以上袁以上这几种药可作为临床用药遥33.1

讨论

根据试验结果袁沙门氏菌对替米考星尧阿莫

阴

沙门氏菌的药物敏感性试验采用世界卫

[4]

概述[J].贵州畜牧兽医,2004(03):21-22.

欢迎访问山东省家禽信息服务系统网站www.sdjqxx.net家禽信息一网打尽西林和林可霉素的耐药性高袁对润达炎迪克尧硫酸

黏菌素尧呼治常安和强力霉素的敏感率高遥在科学用药的前提下袁今后相当长的时间内袁防治鸡源沙门氏菌病可首选阿米卡星尧头孢噻肟尧强力霉素尧硫酸黏菌素尧润达炎迪克尧呼治常安等袁应通过药

成就未来53