化学与生物互旺２０１０，Ｖｏ１．２７ Ｎｏ．１ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ 分析涓试囡 青皮挥发油超临界ＣＯ２萃取的ＧＣ—ＭＳ测定 曹蕾 ，赵国虎 。曹纬。 （１．成阳师范学院化学与ｔ＿Ｔ－学院，陕西成阳７１２０００； ２．甘肃农业大学生命科学技术学院，甘肃兰州７３００７０；３．兰州石油机械研究所，甘肃兰州７３００５０） 摘要：采用超临界ＣＯ 流体苹取中药青皮中的挥发油，通过气相色谱一质谱联用技术对其化学成分进行分离鉴 定，并以面积归一化法测定了各组分的相对含量。结果表明，青皮挥发油的主要化学成分为ｄ－柠檬烯、正二十烷、（ｚ，ｚ， Ｚ）一９，１２，１５一十八碳三烯酸一２，３・二羟丙基酯、（Ｚ）－９－十八碳烯酸甲酯、 谷甾醇、１一甲基－４－（１・甲基乙烯基）－１，２－环已二醇、 椋榈酸甲酯、２一甲基－１－鲸蜡醇等，为青皮的进一步研究利用提供了参考。 关键词：青皮；挥发油；超临界ｃ０ 萃取；气相色谱一质谱 中图分类号：Ｏ ６５７．６３ Ｒ ２８４．１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７２—５４２５（２０１０）０１—００８９—０３ 青皮（Ｐｅｒｉｃａｒｐｉｕｍ ｃｉｔｒｉ ｒｅｔｉｃｕｌａｔａｅ ｖｉｒｉｄｅ）为芸香 科植物橘（Ｃｉｔｒｕｓ ｒｅｔｉｃｕｌａｔａ Ｂｌａｎｃｏ）及其栽培变种的 分离釜Ⅱ中的提取物，以乙醚溶解，经无水硫酸钠干燥 后供ＧＣ—ＭＳ分析。 １－４ ＧＣ－ＭＳ分析 干燥幼果或未成熟果实的果皮，具有疏肝破气、消积化 滞、散结消痰之功效 ］，挥发油是其主要的活性成分之 一气相色谱条件：色谱柱Ｄ ５ ＭＳ石英毛细管柱（３０ ｍ×０．２５ ｍｉＤ＿×０．２５肚ｍ）；程序升温条件：初始温度 ６０℃，保持３ ｒａｉｎ，以１５ ｏＣ・ｒａｉｎ 的速率升至２８０℃，保 口］。目前利用水蒸气蒸馏提取青皮挥发油的研究已 有报道口。］，而超临界ＣＯ 萃取所得挥发油的成分分析 则较少。作者采用超临界ＣＯ 流体萃取青皮挥发油， 通过气相色谱一质谱联用技术对其化学成分进行分析 鉴定，并以面积归一化法测定了各组分的相对含量，拟 为进一步开发利用该植物资源提供参考。 持５ ｍｉｎ；载气：高纯Ｈｅ（≥９９．９ ）；进样量：１肚Ｌ；分流 比：２０：１；气化室温度：２５０℃；进样口温度：２５０℃；载气 流量：１．０ ｍＬ・ｍｉｎ－。；溶剂延迟：３ ｍｉｎ。 质谱条件：电离方式ＥＩ源；电子能量７０ ｅＶ；离子 源温度２２０℃；接口温度２５０℃；扫描范围（ｍ／ｚ）３０～ ５５０ ａｍｔｌ；扫描速率：３０００ ａｍＬｌ・ｓ＿。。 １ 实验 １．１试药与试剂 青皮，购自甘肃省兰州黄河中药批发有限公司，产 地广西省，经鉴定为芸香科植物橘（Ｃｉｔｒｕｓ ｒｅｔｉｃｕｌａｔａ Ｂｌａｎｃｏ）的干燥幼果；无水硫酸钠、乙醚均为分析纯。 ２结果与讨论 ２．１青皮挥发油总离子流图 在设定的实验条件下，对青皮挥发油进行ＧＣ－ＭＳ 测定，得其总离子流图（ＴＩＣ）见图１。 ＣＯ ，食品级（纯度＞９９．９５％），兰州市裕隆公司。 １。２ 仪器 ＨＡ １２１－５０一Ｏ１型超临界萃取装置，江苏南通华安 超临界萃取有限公司；Ｆｉｎｎｉｇａｎ Ｔｒａｃｅ ＧＣ Ｕｌｔｒａ／ＤＳＱ 型气相色谱一质谱联用仪，Ｔｈｅｒｍｏ Ｅｌｅｃｔｒｏｎ Ｃｏｒｐｏｒａ— ｔｉｏｎ；Ｘｃａｌｉｂｕｒ数据处理系统。 １．３超临界Ｃｏ２萃取［４Ｉ５ 称取８０目青皮药粉４００ ｇ，投入１ Ｌ萃取釜中，设 定萃取压力２５ ＭＰａ，萃取温度３５￣Ｃ；分离釜Ｉ压力８ ＭＰａ，温度５５℃；分离釜Ⅱ压力６ ＭＰａ，温度３５￣Ｃ；调 节ＣＯ。流量２Ｏ Ｌ・ｈ一，萃取１．５ ｈ后收集分离釜Ｉ和 收稿日期：２００９—１０—１７ ｔ／ａｉｒｎ 图１青皮挥发油总离子流图 Ｆｉｇ．１ Ｔｏｔａｌ ｉｏｎ ｃｕｒｒｅｎｔ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ ｆｒｏｍ Ｐｅｒｉｃａｒｐｉｕｍ￣ｉｔｒｉ ｒｅｔｉｃｕｌａｔａｅ ｖｉｒｉｄｅ 作者简介：曹蕾（１９８２一），女，陕西西安人，硕士，助理工程师，研究方向：植物天然产物提取与鉴定；通讯作者：赵国虎，教授。 ｍａｉｌ：ｃａｏｌｅｉｂｙ＠１２６．ｃｏｒｎ。 囫 曹蕾等：青皮挥发油超临界Ｃ（）ｚ萃取的ＧＣ－ＭＳ测定／２ｏｌｏ年一１■ 本实验是对超临界ＣＯ 萃取青皮挥发油成分的研 ２．２青皮挥发油ＧＣ－ＭＳ分析 究初探，由图１可见随着温度的升高，基线呈上升趋 对图１中的各峰经质谱扫描后的质谱图经质谱数 势，这可能是由于实验条件设定的原因，有待进一步的 据库检索，并与标准图谱对照，结合有关文献 。 ｑ］， 分析研究。 确定青皮挥发油的化学成分及其相对含量，见表ｌ。 表１ 青皮挥发油化学成分ＧＣ－ＭＳ分析结果 Ｔａｂ．１ ＧＣ－ＭＳ ａｎａｌｙｓｉｓ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ ｏｆ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｊｌ ｆｒｏｍ Ｐｅｒｉｃａｒｐｉｕｍ ｃｉｔｒｉ ｒｅｔｌｃｕｌａｔａｅ ｖｌｒｉｄｅ 由表１可知，经ＧＣ－ＭＳ测定，从超临界ＣＯ：萃取 量的８５．２４ 。主要为萜烯类、醇类、酯类以及长链烷 的青皮挥发油中总共鉴定出１９种化合物，占挥发油总 烃类化合物，其中萜烯类１种，占３．６９ ；醇类３种， 曹蕾等：青皮挥发油超临界ＣＯ，萃取的ＧＣ－ＭＳ测定／２０１０年一１ 田 占８．６２％；酯类５种，占１９．４５ ；长链烷烃类１Ｏ种， 占５３．４８％。相对含量在３ 以上的主要成分有：正二 十烷（１３．５３ ）、正二十四烷（１２．１２ ）、（Ｚ，Ｚ，Ｚ）－９， １２，１５－十八碳三烯酸一２，３一二羟丙基酯（９．０９ ）、（Ｚ）－ 酸甲酯、（Ｚ，Ｚ，Ｚ）－９，１２，１５－十八碳三烯酸一２，３一二羟 丙基酯、正二十烷等，为青皮的进一步研究利用提供 了参考。 参考文献： Ｅｌｌ国家药典委员会．中华人民共和国药典一部ＥＭ］．北京：化学工 业出版社，２００５：１３６－１３７，附录５７－５８． ９一十八碳烯酸甲酯（５．０５ ）、７－己基二十二烷 （４．８４ ）、 谷甾醇（４．８１ ）、１１－（１－乙基丙基）～二十 一［２］郏学钦，沈小萍，刘紫英．陈皮、青皮、枳实和枳壳的气相色谱研究 ＥＪ３．海峡药学，１９９５，７（４）：４－５． 烷（４．８１ ）、７－己基二十烷（４．４５ ）、１１一癸基二十 四烷（４．１３％）、正二十一烷（３．７８ ）、ｄ一柠檬烯 ［３］ 陈维深，黄培良，陈芄．气质联用法分析炮制对青皮挥发油成分的 （３．６９ ）；相对含量在１ ～３ 之间的组分有：１一甲 影响Ｉ－ｊ］。中国中药杂志，２００５，３０（１７）：】３８８—１３８９． 基－４一（１一甲基乙烯基）一１，２一环己二醇（２．６Ｏ ）、９－甲基 Ｅ４］Ｐｏｕｒｍｏｒｔａｚａｖｉ Ｓ Ｍ，Ｐａｒｖｉｎ Ｂ，Ｍｉｒｈｏｓｓｅｉｎｉ Ｍ Ａ．Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ 十九烷（２．４９％）、油酸一３－（十八烷氧基）丙酯 ｖｏｌａｔｉｌｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｆｒｏｍ Ｊｕｎｉｐｅｒｕｓ ｃｏｍｒａｕｎｉｓ Ｌ．１ｅａｖｅｓ ｗｉｔｈ ｓｕ— ｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ ｆｌｕｉｄ ｃａｒｂｏｎ ｄｉｏｘｉｄｅ：Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｗｉｔｈ ｈｙｄｒ０ｄｉｓｔＩｌ】ａｔｉｏｎ （１．９Ｏ ）、棕榈酸甲酯（１．８１ ）、正四十四烷 ［Ｊ］．Ｆｌａｖｏｕｒ Ｆｒａｇｒ Ｊ，２００４，１９（５）：４１７—４２０． （１．７７％）、硬脂酸～３一（十八烷氧基）丙酯（１．６Ｏ ）、２， ｒ５３曹蕾，曹纬．超临界ＣＯ２萃取青皮挥发油的工艺研究［Ｊ］．化学工 ６，１０，１５一四甲基十七烷（１．５６ ）、２－甲基一卜鲸蜡醇 程，２００７，３５（９）：７５－７８． （１．２１％） ［６］Ｍａｒｒｉｏｔｔ Ｐ Ｊ，Ｓｈｅｌｌｉｅ Ｒ，Ｃｏｒｎｗｅｌｌ Ｃ．Ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｔｅｃｈ— ｎｏｌｏｇｉｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｏｉｌｓ［Ｊ］．Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ， ３ 结论 ２００１．９３６（１－２）：１＿２２． Ｅ７］丛浦珠，苏克曼．分析化学手册第九分册一质谱分析（第二版） 利用超临界Ｃ０２流体可从青皮挥发油中萃取出 ［Ｍ］．北京：化学工业出版社，２Ｏ０Ｑ：１０１—９４７． 低沸点、易挥发的小分子物质，如 一柠檬烯等，还可 ［８３ Ｄｏｕｇｌａｓ Ｃ Ｓ，Ｓｈａｎｎｏｎ Ｆ，Ｅｖａｎｇｅｌｏｓ Ｂ，ｅｔ ａ１．Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ ａｎａｌｙｓｉｓ 得到较多的酯类、长链烷烃类等沸点较高、挥发性较 ｏｆ ｃｉｔｒｕｓ ｆｒｕｉｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｂｙ ＧＣ／ＭＳ：Ａｎ ｕｎｄｅｒｇｒａｄｕａｔｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ 小的大分子化合物，如（ｚ）一９一十八碳烯酸甲酯、棕榈 ［刀．Ｃｈｅｍ Ｅｄｕｃａｔｏｒ，２００１，６（１）：２８—３１． Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｖｏｌａｔｉｌｅ Ｏｉｌ Ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｐｅｒｉｃａｒｐｉｕｍ Ｃｉｔｒｉ Ｒｅｔｉｃｕｌａｔａｅ Ｖｉｒｉｄｅ ｂｙ Ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｉ ＣＯ２ Ｆｌｕｉｄ ｂｙ ＧＣ－ＭＳ ＣＡＯ Ｌｅｉ！ ，ＺＨＡＯ Ｇｕｏ－ｈｕ ，ＣＡＯ Ｗｅｉ。 （１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｘｉａｎｙａｎｇ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｘｉａｎｙａｎｇ ７１２０００，Ｃｈｉｎａ； ‘ ２．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｇａｎｓｕ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌａｎｚｈｏｕ ７３００７０，Ｃｈｉｎａ； ３．Ｌａｎｚｈｏｕ Ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ Ｍａｃｈｉｎｅｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｌａｎｚｈｏｕ ７３００５０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ ｆｒｏｍ Ｐｅｒｉｃａｒｐｉｕｍ ｃｉｔｒｉ ｒｅｔｉｃｕｌａｔａｅ ｖｉｒｉｄｅ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ ＣＯｚ ｆｌｕ— ｉｄ．Ｔｈｅ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ ｏｆ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ ｗｅｒｅ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂｙ ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｍａｓｓ ｓｐｅｃ— ｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＧＣ—ＭＳ）．Ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｅａｃｈ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ａｒｅａ ｎｏｒｍａｌｉｚａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｍａｉｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｏｆ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ ｆｒｏｍ Ｐｅｒｉｃａｒｐｉｕｍ ｃｉｔｒｉ ｒｅｔｉｃｕｌａｔａＰ ｉｒｉｄＰ ｗａｒｅ ｆｏｕｎｄ ｔｏ ｂｅ ｄ— ｌｉｍｏｎｅｎｅ，ｎ—ｅｉｃｏｓａｎｅ，（Ｚ，Ｚ，Ｚ）一９，１２，１５一ｏｃｔａｄｅｃａｔｒｉｅｎｏｉｃ ａｃｉｄ一２，３－ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ ｅｓｔｅｒ，（Ｚ）～９一ｏｃｔａｄｅｃｅｎｏｉｃ ａｃｉｄ ｍｅｔｈｙｌ ｅｓｔｅｒ，ｙ－ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ，１－ｍｅｔｈｙｌ一４一（１－ｍｅｔｈｙｌｅｔｈｅｎｙ１）一１，２一ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅｄｉｏｌ，ｈｅｘａｄｅｃａｎｏｉｃ ａｃｉｄ ｍｅｔｈｙｌ ｅｓｔｅｒ， ２－ｍｅｔｈｙｌ一１～ｈｅｘａｄｅｃａｎｏｌ，ａｔ ａ１．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｐｒｏｖｉｄｅ ｐｒｏｆｉｔａｂｌｅ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ ａｎｄ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｆｕｒｔｈｅｒ ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｐｅｒｉｃａｒｐｉｕｍ ｃｉｔｒｉ ｒｅｔｉｃｕｌａｔａｅ ｖｉｒｉｄｅ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｐｅｒｉｃａｒｐｉｕｍ ｃｉｔｒｉ ｒｅｔｉｃｕｌａｔａｅ ｖｉｒｉｄｅ；ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ；ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ ＣＯｚ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ＧＣ－ＭＳ
