安定类药物分析研究进展

中国现代药物应用2008年1月第2卷第2期　ChinJModDrugAppl,Jan2008,Vol.2,No.2

6　疼痛护理

心肌梗死患者常有剧烈的疼痛,疼痛可使心肌耗氧量增加而导致心肌梗死面积扩大。因此,需要迅速的给予有效的止痛剂。遵医嘱给予吗啡、甘油等药物镇痛、扩张血管时,应注意随时观察患者疼痛的变化情况,专人守护。7　心电监护

心肌梗死患者确诊后应立即进入监护病房,进行心电监护。严密观察体温、呼吸、脉搏、血压等生命体征。加强观察,密切监护,及早发现并发症。①心律失常:急性心肌梗死患者并发心律失常常发生在24h之内。以室性心律失常最多见。连续的心电监测可及时发现可能作为心室颤动先兆的任何室性早搏及室性心动过缓,房性心律失常等,及时予以纠治。护士应正确识别各种心律失常的图形,确保连续的心电监测质量,控制恶性心律失常的发生;②心力衰竭:多发生于心肌梗死时的最初几天,以左心衰竭为主。护理人员应严密观察患者呼吸、心率的变化。一旦出现呼吸急促、心率增快、烦躁、紫绀、咳嗽、咳粉红色泡沫痰等急性左心衰竭症状时,应立即报告医生采取急救措施;③血压监测:如果收缩压低于90mmHg,应结合神志、意识的变化、皮肤的颜色、末

梢循环情况等判断是否休克,如果是休克应给予抗休克处

理,积极抢救。

8　溶栓护理

早期溶栓治疗能有效的缩小梗死范围,改善左心室功能,显著降低急性心肌梗死患者的近期和远期病死率,已成为急性心肌梗死治疗中最重要的方法之一。溶栓治疗最常见的并发症为出血,应注意观察皮肤黏膜有无出血倾向及呕血、便血征象。注意有无药物的不良反应或过敏反应。观察胸痛的性质、持续时间、意识、语言状态及肢体治疗情况等,判定溶栓效果,发现异常及时处理。溶栓可发生再灌注性心律失常,以溶栓治疗后4h内发生率最高。因此,溶栓治疗时应持续心电监护,严密观察各种心律失常及生命体征变化。备好各种抢救药品如利多卡因、阿托品等及抢救器械。9　康复期护理

鼓励患者树立乐观向上的思想,安心休养,避免诱发心绞痛因素,减少患者情绪激动,保持精神愉快,可以减少再发。在做好患者的心理护理的同时,还要做好家属的疏导工作,使患者和家属之间建立起一种新的有利于疾病康复的心理环境。

·综述·

安定类药物分析研究进展

乔宛虹

【摘要】　安定类药物是当前滥用程度最高的处方药。本文着重介绍了近年来生物样品中安定类药物及其代谢物的分析研究进展。

　　安定类药物主要包括、安定(地西泮)、舒乐安定(艾司)、(阿普)以及氯硝安定(氯硝西泮)。这类药物是目前临床应用十分广泛的镇静、催眠、抗焦虑药物,同时也是世界上处方量最大、滥用程度最高的处方药[1]。据最新资料显示[2],94%以上的使用者有过海洛因滥用史。因此对此类药物的分析检测受到越来越多的医药工作者的重视。本文着重介绍了近年来生物样品中安定类药物及其代谢物的分析研究进展。

1　样品的预处理技术

当前我们对滥用安定类患者采取的检测方法是测血液或尿液。这与常规药物分析相比主要存在待测组分含量极微,可供使用样品量少,样品复杂,存在各种各样的干扰物质(如蛋白质、盐类等)以及内源性物质结合药物会形成亲水物等问题,因而样品的预处理就显得尤为重要。样品预处理的目的在于减少杂质对待测物的干扰及对试样中的痕量待测组分进行预富集。传统的样品预处理方法手续复杂耗时、溶剂毒性大、回收率低,而近年来出现的一些新技术,为样品的预处理提供更有力的工具。

1.1　固相微萃取(SPME)　SPME是近年来发展起来的一种非溶剂样品制备技术。利用分析物对活性固体表面有一定的吸附亲合力而达到富集的目的。SPME集萃取、浓缩、进样于一身,极大地提高了分析速度,而且易于实现自动化,因而倍受青睐。Singer等[3]将聚二甲基硅烷(PDMS)和聚丙烯酸

　　作者单位:150001黑龙江省药品不良反应监测中心微萃取纤维头直接浸入尿液中,调节pH=12,40℃时平衡提取20min,分析安定类药物及其代谢物。Yuan等[4]用管内

微萃取将样品直接注入开管毛细管柱,通过反复注入喷出将安定类药物从尿或血清中分离出来。1.2　固相萃取(SPE)　固相萃取因具有消耗溶剂少、对样品污染少及萃取效率高等优点,目前已广泛应用于体内药物的萃取。Znoue等[5]使用含有亲水和亲脂平衡共聚物的Oa-sisHLB固相萃取柱对全血中的19种安定类药物进行萃取并分析,线性范围为5～500ng/ml,LOD为0.2～20ng/ml。Nguyen等[6]使用含有粘合硅胶的固相萃取柱萃取了尿液中的氟硝安定及其两种主要代谢物。

1.3　超临界流体萃取(SFE)　SFE是使用一种具有极强的溶解能力、良好的流动性及传递性能的超临界流体(SF)代替传统的有毒、易挥发、易燃的有机溶剂。CO2因其无毒价廉成为应用最为广泛的SF。SFE适于热敏感物质和复杂样品中微量组分的萃取。目前已应用于体内药物分析。Sim-[7]mons等采用SFE技术从血清和水中萃取安定类药物及其同化物(anabolicdrug),并结合HPLC法分析。与液-液萃取(LLE)和SPE的实验结果相比较,采用SFE时回收率及精密度都大大提高。1.4　柱切换技术　柱切换技术最显著的特点是其在线分离。在不降低灵敏度的情况下,不仅增强了色谱的选择性,对微量样品进行富集,防止样品在预处理中受到污染;还能在一个柱切换体系内以多种切换方式来分离复杂的组分。ElMahjoub等[8]采用该技术分析了血浆或血清中的5种常

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见的安定类药物:将血浆(5μl)样品直接注入含疏水聚合物的BioTrap500MS中,用磷酸缓冲液及乙腈将生物基质充分洗脱后,再用乙腈-磷酸缓冲液(流动相)将药物反冲至一反

相柱(LIChrospherSelectBC8)中分析,结果氯硝安定、氟硝安定和咪哒的线性范围为50～1000ng/ml;安定和去甲羟安定的线性范围为50～5000ng/ml。由于在线分离,整个分析过程约为30min。ElMahjoub等[9]采用该技术测定了人头发中上述5种药物,检测限为0.2ng/ml。1.5　免疫亲合色谱(IAC)　IAC作为分析过程前期的样品纯化方法,由于其样品纯化、转移和分析的整个过程均实现自动化操作,并可与其他技术联用实现进一步的定性或定量分析而受到关注。IAC-HPLC是目前较成熟的技术,即用免疫亲合柱代替液相色谱柱。如Deinl等[10]应用该技术分析尿中氟硝安定及其代谢物。采用一根含固定抗体的免疫萃取柱(IAC)、一根预浓缩柱(PC)和一根分析柱(AC),通过柱切换方式实现自动控制。整个过程需40min,氟硝安定及其3个主要代谢物的LOD均小于2ng/ml。2　药物及其代谢物的检测

目前常采用色谱法测定安定类药物及其代谢物,以HPLC法和GC法为主,而毛细管电泳(CE)法由于其高效分离、快速分析和微量检测的特点应用愈来愈广泛。色-质联

用技术(LC-MS、GC-MS、CE-MS以及MS/MS等)的发展为药物及其代谢物的定性定量提供了更有力的检测手段。高效专一的免疫分析在体内药物分析中也具有不可替代的作用[11]。2.1　GC法　GC法是最先兴起的具有分离和分析两种功能的测定技术。它不仅具有高度的选择性,而且还具有较高的灵敏度,因而适于生物样本中的药物分析。GC法测定中,因有些药物及其代谢物极性大、挥发性低、对热不稳定等原因,常需衍生化后进行分析。刑丽梅等[12]采用电子捕获检测器(ECD)测定了人尿中氟硝西泮的代谢物7-氨基氟硝西泮。将样品用β-葡萄糖醛酸苷酶水解后用碱性液-液萃取,再用

七氟丁酸酐衍生化,可检出服药60h后尿中的7-氨基氟硝西

[13]

泮,检出限为1.2μg/ml。姜兆林等采用氮磷检测法,用N,O双(三甲硅烷基)三氟乙酰胺(BSTFA)衍生化后进行三甲硅烷基(TMS)衍生化检测,尿中劳拉西泮检测限为5μg/ml。2.2　HPLC法　HPLC法可提供痕量水平测定所需的灵敏度及高度的自动化,其检测限为0.1%或更低,目前在生物样品分析中应用最广。二极管阵列检测器的应用,为HPLC法在搜索与判断药物与代谢物峰时安上了“眼睛”。KariK.等[14]将血清或血浆样品通过自动的固相萃取,应用HPLC-DAD法分析了3种低浓度的安定类药物,检测限为5nmol/

[8]

L,回收率为94%～100%。ElMahjoub等也使用HPLC-DAD法分析了人发中5种安定类药物。2.3　HPCE法　HPCE法分离模式多、分离效率高、应用范围广、样品用量少、成本低,在体内药物分析中显示了特有的优越性。胶动电动毛细管电泳(MEKC)的一个显著用途是可以分离中性分子。而毛细管区带电泳(CZE)不但能分离中小分子,还适于大分子及分散系数小、HPLC法分离困难的

[15]

样品,Schaforth等提出应用MEKC法,以75mmol/L十二烷基硫酸钠为表面活性剂,pH9.3的硼酸-磷酸液及少量的改性剂作为背景电解质,分析了尿液中8种安定类药物。作者还同现在的放免测定法进行了比较,结果CE法灵敏度较高。廖等提出以pH2.5的0.05mol/L磷酸缓冲液为运行缓冲液,以可待因为内标,采用CZE法测定大鼠体内地西泮的血药浓度,LOD为1μg/ml。Smyth等综述了CE在测定

体内安定类药物的应用。

2.4　色-质联用技术　色谱与质谱的联用是目前药物分析中最为活跃的技术,能够使样品的分离、定性、定量一次完成。色谱技术为质谱提供了纯化的试样,质谱则提供准确的结构信息。目前与质谱联用的技术主要有GC、LC、CE等。

GC-MS联用已是一门成熟的分析技术,确定药物的结构既有较高的灵敏度,又可定量分析。适合于挥发性强、热稳定的药物的分离。Nguyen等采用GS-MS法分析人尿中氟硝西泮及2种主要代谢物,选择性和灵敏度都很好。Staerk等将尿液(血清)经高温SPME及同时衍生化后,通过选择性离子监测的方式,用GC-MS法分析了几种违禁药物(安定类等)。

GC-MS联用虽然具有很高的灵敏度,但对药物的热稳定性有一定的要求,其中多数还必须经过衍生化步骤,局限性很大。而LC-MS联用样品预处理简单,分析范围广,一般无需衍生化,因此LC-MS更适于体内药物的分离与鉴定。Yuan等[4]应用ESI(电喷雾电离)-MS法通过选择性离子监测测定了7种安定类药物,LOD为0.02～2ng/mlDarius等采用HPLC-大气压电离串联质谱法监测了人血清中氟硝西泮的含量。样品经HPLC分离后,使用灵敏度高且选择性好的离子捕获检测器检测,氟硝西泮的定量限为0.5ng/ml。

毛细管电泳(CE)被认为是一种高速、高效的分离技术,但常用的紫外检测器受光路短的影响,灵敏度略显不足。质谱的选择性和专一性弥补了在CE样品中迁移时间变化的不足,因而CE-MS联用技术近年来得到迅速发展。CE的许多模式都可与质谱检测器相连,其中应用较多的是CZE-MS。Lansecker等采用CZE-ESI-MS方法对人血浆中的咪哒及其3种代谢物进行分析,咪哒的检测限为500pg/ml,代谢物的检出限为2ng/ml。作者还与HPLC-ESI-MS法作了比较,结果CZE-ESI-MS的灵敏度更高。3　结语

安定类药物是一类重要的滥用药物,HPLC和GC法已成为生物体液中安定类药物分离的有效手段;而CZE方法对研究安定类药物结合物这样带电荷的代谢物很有价值;色-质联用为药物及代谢物的分析鉴定提供了更有力的工具。随着现代分析技术的进步,可以期望患者体液中的安定类药物及其代谢物的分析会有新的进展。

参考文献

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