维普资讯 http://www.cqvip.com 分析技术，研究ｎｕｃｌｅｏｐｂｏｓｍｉｎ（ＮＰＭ）在核基质上的表达 和定位变化，及其与相关基因产物的共定位关系，观察研究 了ｎｕｃｌｅｏｐｈｏｓｍｉｎ在诱导分化前后人肝癌ＳＭＭＣ一７７２ １细 胞核基质中的存在、分布及其与相关基因产物的共定 位关系。双向凝胶电泳和质谱鉴定结果显示， ｎｕｃｌｅｏｐｈｏｓｍｉｎ存在于ＳＭＭＣ一７７２１细胞核基质蛋白组分 中，在ＨＭＢＡ处理后细胞核基质中表达下调。蛋白质印 迹杂交实验结果确证了ｎｕｃｌｅｏｐｈｏｓｍｉｎ在核基质中的存 在及其在诱导处理后细胞核基质中表达下调的变化。 免疫荧光显微镜观察显示，ｎｕ ｃ１ ｅｏＰｈＯ Ｓｍｉｎ定位在 ＳＭＭＣ一７７２ １细胞核基质上，经ＨＭＢＡ处理后出现分布位 置与表达水平的变化。激光扫描共聚焦显微镜观察结 果显示，ＳＭＭＣ一７７２ １细胞中，ｎｕｃｌｅｏｐｈｏｓｍｉｎ与ｃ—ｆｏｓ、Ｃ— 显减慢，ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ ｍＲＮＡ表达下调（ ０．０５），细胞 分化迟滞。结果表明，足细胞分化过程中伴随细胞骨 架的重新分布和细胞形态的改变；ＣＤ２ＡＰ可能作为足 细胞裂孔隔膜分子与细胞骨架的连接蛋白，在足细胞 分化过程中发挥重要作用。图７参１７ Ｑ２６ ２００８０７２６８１ 小鼠脂联素受体一１的生物信息学分析及其抗备 ＝Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｍｏｕｓｅ ａｄｉｐｏｎｅｃｔｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ １ ａｎｄ ｉｔｓ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ／许言午（山西医科大学生 物化学与分子生物学教研室．山西，太原０３０００１），闫莉…／／ 生理学报．一２００８，６０（１）．一１５６～１６０ 该文旨在根据小鼠脂联索受体一１（ａｄｉｐｏｎｅｃｔｉｎ ｒｅｃｅｐ— ｔｏｒ一１，ＡｄｉｐｏＲ一１）的分子结构，制备抗ＡｄｉｐｏＲ一１的多克隆 ｍｙｃ、ｒｂ、ｐ５３等基因产物具有共定位关系，但在诱导处 抗体，为ＡｄｉｐｏＲ一１的进一步研究创造条件。利用生物信 理后细胞内的共定位区域发生了改变。研究结果证实， 息学分析预测小鼠ＡｄｉｐｏＲ一１的理化特性、跨膜结构和 ｎｕｃｌｅｏｐｈｏｓｍｉｎ是一种核基质蛋白，定位于核基质纤维上， 抗原表位，结合ＡｄｉｐｏＲ一１和ＡｄｉｐｏＲ一２氨基酸序列相似 ｎｕｃｌｅｏｐｈｏｓｍｉｎ在人肝癌ＳＭＭＣ一７７２ １细胞诱导分化过程 性比对结果，设计出一段由１６个氨基酸组成的多肽，用此 中的表达分布，及其与相关癌基因、抑癌基因产物的关系 肽段免疫大鼠得到多克隆抗体，利用ＥＬＩＳＡ、Ｗｅｓｔｅｒｎ 对ＳＭＭＣ一７７２１细胞分化具有重要影响。图４表１参１６ ｂｌｏｔ等方法鉴定其特异性和滴度，并将该抗体用于正常及 Ｑ２６ ２００８０７２６８０ 高胆固醇血症小鼠肌肉组织ＡｄｉｐｏＲ一１的表达检测。结 ＣＤ２相关蛋白在足细胞分化中的作用＝Ｒｏｌｅ ｏｆ ＣＤ２一 果表明，此抗体效价较高、特异性强。以上结果提示，生 ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｐｏｄｏｃｙｔｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ／姜华军（华 物信息学分析能较好地预测小鼠ＡｄｉｐｏＲ～１的抗原表位， 中科技大学同济医学院附属协和医院肾内科．湖北，武汉 并成功制备高特异性的多克隆抗体。图６参１２ ４３００２２），常莹…／／生理学报、一２００８，６０（１）．一１ ３５～１ ４２ Ｑ２６ ２００８０７２６８２ 该文旨在研究肾脏足细胞的分化特点及ＣＤ２相关蛋 ＮＯＫ通过ＪＡＫ２依赖性方式激活ｓＴＡＴ３信号通路 Ｉ￣（ＣＤ２一ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＣＤ２ＡＰ）在足细胞分化过程 ＝ＮＯＫ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ＳＴＡＴ３ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｂｙ ａＪＡＫ２一ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ 中的作用。用ＲＰＭＩ １６４０培养基在３３℃许可条件下培养 ｍｅｃｈａｎｉｓｍ［英］／李颖华（清华大学医学院，清华大学生物科 永生化小鼠足细胞系（未分化组），转染针对ＣＤ２ＡＰ的 学与技术系，生物膜与膜生物技术国家重点实验室、北京 小分子干扰ＲＮＡ（ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡ，ｓｉＲＮＡ）后置于 １ ０００８４），戎煜…／／生物化学与生物物理进展．一２００８，３５ ３７￣Ｃ￣许可条件下培养（转染组），并将非许可条件下未 （２）．一１４３－１５０ 转染组作为对照组。用ＭＴＴ法检测足细胞的生长速 ＮＯＫ＇￣ｇ激活包含ＪＡＫ—ＳＴＡＴ信号通路在内的多种促 度；用ＲＴ—ＰＣＲ方法检测ＣＤ２ＡＰ、ＷＴＩ、ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ 细胞有丝信号通路。研究发现，在人胚肾细胞 和ｎｅｐｈｒｉｎ ｍＲＮＡ表达；用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌ ｏｔ检测ＣＤ２ＡＰ、 （ＨＥＫ２９３Ｔ）中，ＮＯＫ与ＳＴＡＴ３具有直接的相互作用。进 ＷＴ１和ｎｅｐｈｒｉｎ蛋白表达；用免疫荧光结合激光共聚焦 一步的实验表明，ＮＯＫ能同ＳＴＡＴ３蛋白除螺旋结构域及 方法检测ＣＤ２ＡＰ、ｎｅｐｈｒｉｎ、Ｆ—ａｃｔｉｎ和ｔｕｂｕｌｉｎ在分化 Ｃ端结构域外的其他４个结构域发生相互作用，而ＮＯＫ的 及未分化足细胞中的分布及其共定位情况。结果显 胞内区则介导了ＮＯＫ同ＳＴＡＴ３的相互作用。同时，免 示，ＣＤ２ＡＰ、ｗ Ｔ１和ｎｅｐｈｒｉｎ在分化及未分化足细胞 疫共沉淀实验显示，ＮＯＫ能与ＪＡＫ２发生相互作用。重 中均可稳定表达，而ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ仅表达于已分化足 要的是，共同表达ＮＯＫ与ＪＡＫ２蛋白对ＳＴＡＴ３信号通路 细胞，在未分化足细胞无表达。在足细胞分化过程 能产生一种非常显著的协同激活作用，但当共同表达ＮＯＫ 中，ＣＤ２ＡＰ和ｎｅｐｈｒｉｎ的表达上调（尸＜０．０５ ＣＤ２ＡＰ、 和ＪＡＫ２的激酶活性缺失突变体时，并不产生这种协同激 ｔｕｂｕｌｉｎ和Ｆ—ａｃｔｉｎ在细胞内的分布发生改变，ＣＤ２ＡＰ与 活效应。综上，实验结果显示，ＮＯＫ可能同ＳＴＡＴ３和 ｎｅｐｈｒｉｎ及Ｆ—ａｃｔｉｎ在未分化足细胞中存在共定位关系。 ＪＡＫ２形成一个复合物，通过ＪＡＫ２依赖性方式激活 转染特异性ｓｉＲＮＡ下调ＣＤ２ＡＰ表达，细胞生长速度明 ＳＴＡＴ３信号通路。图４参２０ Ｑ３遗传学 Ｑ３４３ ２００８０７２６８３ 深圳５１８０３６），秦洁…／／解剖学报．一２００８，３９（１）．一８３－８７ 人胚胎干细胞表达生殖细胞分化相关基因的研究 探讨人胚胎干细胞（ｈＥＳ）系Ｈ１生殖细胞分化相关基 ：Ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｇｅｒｍ ｃｅｌｌ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ａｓｓｏ— 因的表达。免疫荧光、碱性磷酸酶检测和核型分析等 ｃｉａｔｅｄ ｇｅｎｅｓ ｏｎ ｈｕｍａｎ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ／郭新（深圳 方法联合鉴定Ｈ１的基本生物学特性，ＲＴ—ＰＣＲ方法检测 市男性生殖与遗传重点实验室，北京大学深圳医院．广东， 未分化Ｈ１的生殖细胞分化相关基因的基本表达模式，分 ８一 维普资讯 http://www.cqvip.com 别以人正常睾丸组织和人胚胎成纤维细胞株ＨＦＦ一１作为 阳性和阴性对照组织。Ｈ１保持正常核型并维持未分化 状态。未分化Ｈ１表达减数前生殖细胞标志基因 ＳＴＥＬＬＡＲ、ＤＡＺＬ、ＦＲＡＧＩＬＩＳ、ＰＵＭ１、ＰＵＭ２和 ＧＤＦ３；不表达原始生殖细胞（ＰＧＣｓ）标志基因ＢＬＩＭＰ一１、 减数特异标志基因ＳＣＰ１、减数启动标志基因 ＳＴＲＡ８以及生殖细胞分化后期标志基因ＶＡＳＡ。未分化 Ｈ１细胞表达生殖细胞减数前标志基因，但不表达分 化后期基因，ＢＬＩＭＰ一１可能成为区分未分化ｈＥＳ细胞与 ＰＧＣｓ的特异性标志基因。图２表１参１ ３ Ｑ４生理学 Ｑ４２ ２００８０７２６８４ 用适应性实验对ＩＣＲ．ＢＡＬＢ／ｃ和Ｃ５７ＢＬ／６小鼠探索 行为及记忆能力的评价＝Ａｓｓｅｓｓｉｎｇ ｅｘｐｌｏｒａｔｏｒｙ ｂｅｈａｖ— ｉｏｒ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ｉｎ ＩＣＲ，ＢＡＬＢ／ｃ ａｎｄ Ｃ５７ＢＬ／６ ｍｉｃｅ ｕｓｉｎｇ ｈａｂｉｔｕａｔｉｏｎ／施俊巍（中科院上海生命科学研究院．上海 ２００２３３），邹洪…／／动物学研究．一２００８，２９（１）．一４９－５５ 用洞板仪和旷场行为红外线检测系统对远交群ＩＣＲ 小鼠、近交系ＢＡＬＢ／ｃ小鼠和近交系Ｃ５７ＢＵ６小鼠的探 洞、直立和跨格行为进行了测试，并通过适应性实验 比较了它们的探索行为和记忆能力。研究发现：在各 项试验中，ＩＣＲ小鼠表现出最强的探索能力，而Ｃ５７ＢＬ／ ６小鼠的探索能力最差；ＩＣＲ小鼠还表现出比另外两个 品系小鼠更强的对新环境的适应性，其记忆也明显优 于Ｃ５７ＢＬ／６小鼠。实验结果提示：小鼠探洞行为的适 应性实验可以用来测试小鼠的记忆能力，而小鼠的直 立行为在一定程度上也反映了其对周围环境、事物的 探索和认知。这些结果为今后在研究小鼠神经生物学 时的行为学指标选择问题提供了参考依据，同时也提 示了在进行小鼠行为学实验时，根据不同研究目的选 择不同品系的重要性。图４表１参１ ２ Ｑ４２ ２００８０７２６８５ 部分背根切断及针刺对备用背根节神经元血小板源 性生长因子表达的影响＝Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｌａｔｅｌｅｔ ｄｅｒｉｖｅｄ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｓｐａｒｅｄ ｄｏｒｓａｌ ｒｏｏｔ ｇａｎｇｌｉｏｎ ａｆｔｅｒ ｐａｒｔｉａｌ ｄｏｒｓａｌ ｒｏｏｔ ｒｈｉｚｏｔｏｍｙ ａｎｄ ｔｈｅ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ／ 张连双（滨州医学院组织学与胚胎学教研室．山东，烟台 ２６４００３），王希锋…／／解剖学杂志，一２００８，３ １（１），一６８～７０ 探讨部分去背根及部分去背根后针刺对备用背根节 神经元血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）表达的影响。制备 猫双侧备用背根节模型，并针刺位于右侧备用根支配区的 两组穴位，针刺７ｄ及１ ４ｄ后分别取针刺、非针刺侧备用 背根节，行免疫组织化学ＡＢＣ法显色。分别计数各组阳 性神经元总数以及大、中小阳性神经元的数量。ＰＤＧＦ 在备用背根节的大、中小神经元均有表达。部分背根 切断后，针刺侧、非针刺侧ＰＤＧＦ阳性神经元总数及中小 阳性神经元数在７ｄ时较正常显著减少，针刺后７ｄ时， ＰＤＧＦ阳性总数及大神经元数针刺多于非针刺侧，针刺 １４ｄ时，阳性总数及中小神经元数多于非针刺侧。部分背 根切断及针刺可影响ＰＤＧＦ在备用背根节的表达，这种作 用显效的时间因不同时相、不同类型的背根节神经元 而异。图１表１参９ Ｑ４２ ２００８０７２６８６ 实验性结肠炎对脊髓传入神经元中降钙素基因相关 肽和香草酸受体１表达的调节＝Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎ ｔａｌ ｃｏｌｉｔｉｓ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ ｇｅｎｅ—ｒｅｌａｔｅｄ ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｄ ｖａｎｉｌｌｏｉｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ １ ｉｎ ｒａｔ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｓｅｎｓｏｒｙ ｎｅｕｒｏｎｓ［英１／杨霞（山东大学附属山东省立医院肿瘤研究 治疗中心 山东，济南２５００２１），韩俊庆…／／生理学报．－２００８， ６０（１、 一１４３－１４８ 该文旨在探讨肠道局部炎症对脊髓肠道感觉传入神 经通路的近期及远期效应，应用三硝基苯磺酸 （ｔｒｉｎｉｔｒｏｂｅｎｚｅｎｃｓｕｌｆｏｎｉ ａｃｉｄ，ＴＮＢＳ）建立大鼠结肠炎动物模 型，用ＤｉＩ（３）逆行神经标记法识别支配肠道炎症部位的 脊髓背根神经节（ｄｏｒｓａｌ ｒｏｏｔ ｇａｎｇｌｉａ，ＤＲＧ）神经元，通过 肉眼观察、平均组织损伤评分及髓过氧化物酶活性测 定等方法评价肠道组织的炎症反应状态，用免疫组织 化学法测定香草酸受体１（ｖａｎｉｌｌｏｉｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ １，ＶＲ １）和降 钙素基因相关肽（ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ ｇｅｎｅ～ｒｅｌａｔｅｄ ｐｅｐｆｉｄｅ，ＣＧＲＰ） 在支配结肠炎症部位的ＤＲＧ神经元中的表达，比较炎 症不同阶段（给予ＴＮＢＳ后７、２１、４２ｄ）ＣＧＲＰ和ＶＲ１阳 性神经元的数目。结果显示，炎症急性期（即给予ＴＮＢＳ 后７ｄ）结肠黏膜肉眼可见明显损伤，同时相应ＤＲＧ中表 达ＣＧＲＰ及ＶＲ１的神经元增加近２倍［（９５．３８±９ ４５）％ＶＳ （４２ ８６±５ ０２）％，（８９．２３±８．２１）％ｖｓ（３２．５４±４ ５８）％１。 给予ＴＮＢＳ后２１、４２ｄ，肠道炎症反应已完全消退，但 表达ＣＧＲＰ及ＶＲ１的ＤＲＧ神经元数目仍明显高于对照组 『（８６．２５±８．２１）％，（６８，２８±７，１２）％ｖｓ（４２，８６±５．０２）％； （６７．２２±６，５２）％，（５６．２５±４．８６）％ｖｓ（３２．５４±４，５８）％１。 结果提示，肠道局部炎症可以上调支配肠道的脊髓传 入神经元中ＣＧＲＰ和ＶＲ１的表达，这种异常表达可以持 续至肠道炎症反应消退后的一定时间。图４参１ ６ Ｑ４２ ２００８０７２６８７ 小鼠听皮层对下丘神经元方位敏感性的 Ｃｏｒｔｉｃｏｆｕｇａｌ ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉｒｅｃｔｉｏｎａｌ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｔｈｅ ｍｏｕｓｅ ｉｎｆｅｒｉｏｒ ｃｏｌｌｉｃｕｌｕｓ／韩琳琳（华东师范大学生命科 学学院，脑科学研究中心．上海２０００６２），杨文伟…／／生物物 理学报．一２００８，２４（１），一６－１４ 应用常规电生理学技术，研究小鼠听皮层对中脑下丘 神经元方位敏感性的下行调制。实验记录了１ ９８个下丘 神经元的听反应，这些神经元的最佳方位角大多数（８４。８％） 位于听空间对侧２０。一５０。范围内。根据神经元的方 位敏感曲线特征，将这些神经元分为方位选择型、半场 型、多峰型和全向型四种调谐模式。电刺激听皮层对 绝大多数下丘神经元方位角的范围产生易化（４２．０％）或抑 制（４５．０％）效应，并使５９．３％的神经元的最佳方位角发生了 转移。结果提示，小鼠下丘神经元具有明显的方位敏感 性，听皮层对下丘神经元听觉方位信息处理具有下行调制 作用。此研究结果为深入研究中枢听觉信息处理的离 一９一
